Analisis De Principios Activos

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA «ESTUDIO FITOQUÍMICO Y EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIDERMATÓFICA IN VITRO DEL LÁTEX DE Brosimum utile (KUNTH DE SANDI)» TESIS DE GRADO PREVIA LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE BIOQUÍMICO FARMACÉU ICO AUTOR: ALEX LEONARDO JIM TUTOR: Lcda. Karen Acosta, RIOBAMBA – ECUAD 2015 AGRADECIMIENTO 2 p A todos mis profesores, que gracias a sus conocimientos, logré alcanzar mi formación profesional. A la Lcda. Karen Acosta, M. Sc. , quien con su asesoramiento, tiempo y dedicación, me ha uiado para poder culminar la presente tesis.

Al BQF. Diego Vinueza, M. Sc. , gracias a su colaboración y valiosos conocimientos, se logró superar inconvenientes durante la realización del presente estudio. Dra. Ana Albuja L, M. Sc. DIRECTORA ESCUELA BIOQUÍMICA Y FARMACIA Lcda. Karen Acosta, M. Sc. DIRECTOR DE TESIS BQF. Diego Vinueza, M. SC. MIEMBRO DEL TRIBUNAL BQF. Fausto Contero COORDINADOR SISBIB – ESPOCH 62 -1 1. 1. 1Brosimum utile -2 1. 2 Clasificación botánica ….. -31. 2. 1. Hábitat y distribución . -3 1. 2. 2 Descripción botánica . — -3 1. 4 Dermatofitosis -5 1. 7. 1 Dermatofitos — . . . 5 1. 4. 1 . 1 Clasificación y descripción -6 1. 4. 1 Infecciones por dermatofitos — — -6 1. 7 Cromatografía en Capa Fina (CCF) . . 10 1. 7. 1 Fundamento teórico 10 2. PARTE EXPERIMENTAL -12 2. 1 Lugar de investigación reactivos — . 12 2. 2 Materiales, equipos y 62 2. 2. 2 Materiales de laboratorio 12 2. 2. 3 Equipos 13 2. 3 Técnicas y métodos . 12 13 2. 2. 4 reactivos vegetal . 14 2. 3. 1 Obtención de la muestra 14 – 2. 3. 3 amizaje fitoquímico — . 14 2. 3. 3. 1 Procedimiento . – 14 2. 3. 3. 2 Descripción de los métodos 8 2. 3. 3. 2. 1 Ensayo de sudan . 8 2. 3. 3. 2. 2 Ensayo de baljet…… — — 18 2. 3. 3. 2. 3 Ensayo de liebermann- buchart 19 2. 3. 3. 2. 4 Ensayo de dragendorff mayer . 19 2. 3. 3. 2. 5 Ensayo de 4 62 20 2. 3. 3. 2. 6 Ensayo de wagner – 20 2. 3. 3. 2. 7 Ensayo de resinas 20 2. 3. 3. 2. 8 Ensayo de fehling 20 2. 3. 3. 2. 9 Ensayo espuma . 20 2. 3. 3. 2. 10 Ensayo cloruro férrico.. 21 2. 3. 3. 2. 11 Ensayo de ninhidrina . 21 2. 3. 3. 2. 12 Ensayo de borntrager . 21 2. 3. 3. 2. 13 Ensayo de shinoda 22 2. 3. 3. 2. 14 Ensayo de kedde 22 2. 3. 3. 2. 15 Ensayo de antocianidinas 2 2. 3. 3. 2. 6 Ensayo de mucllagos 22 2. 3. 3. 2. 17 Ensayo de catequinas — 23 2. 3. 3. 2. 18 Ensayo de principios amargos . Pruebas de solubilidad 23 2. 3. 4 s 2 23 2. 3. 5 Obtención del extracto purificado alcaloide — 23 2. 3. 5. 1 Rendimiento de extracción de alcaloides 28 2. 3. 6 Cromatografía en Capa Fina (CCF) _ 28 2. 3. 6. 2 Ensayos en Cromatografia en Capa Fina 29 – empleados – 28 2. 3. 7 Determinación de las propiedades organolépticas y físicas del extracto alcaloideo 2. 3. 7. 1 color • • • • • • • • • • • • 29 2. 3. 7. 2 Olor 29 2. . 7. 3 Aspecto 29 2. 3. 8 Pruebas antimicrobianas in vitro 30 2. 3. 8. 1 Esterilización de materiales 30 2. 3. 9. 1 Preparación de caldo de cultivo Soya Tripticasa (TSB) — microorganismos ATCC . 30 2. 3. 9. 2 Suspensión de 30 2. 3. 9. 3 Siembra de microorganismos ATCC — 6 62 microorganismos ATCC . 31 2. 3. 9. 4 Almacenamiento de cepas ATCC reactivadas 31 2. 3. 10 Metodología para el estudio de la actividad Agar con Disco — – antifúngica. 32 2. 3. 11 -32 2. 3. 11. 1 Difusión en 32 2. 3. 11 Metodología para el estudio de la actividad antibacteriana . 2. 3. 11 . 1 Método de Mitscher . 1. 1 Preparación de 33 2. 3. 11 las placas — 33 2. 3. 11 . 1 Estriado de microorganismos – 34 2. 3. 12 Concentración Mínima Inhibitoria . 35 3. RESULTADOS Y DISCUSIONES . 36 3. 1 Tamizaje fitoquímico — 36 3. 2 pruebas de solubilidad . – 40 3. 3 Obtención del extracto puro de 40 3. 3. 1 Rendimientos 7 62 41 3. 4 Cromatografía en Capa Fina para 49 _ -42 3. 5 Determinación de las propiedades organolépticas y físicas del extracto alcaloideo 44 3. 7 Determinación de la actividad antibacteriana del extracto alcaloideo..

Método de Mitscher -44 3. 7. 1 45 3. 8 Determinación de la actividad antifúngica del extracto alcaloideo 3. 8. 1 Método Difusión en Agar con Disco (hongos) – 49 CONCLUSIONES . 52 RECOMENDACIONES — . 54 RESUMEN BIBLIOGRAFÍA 55 AN – 60 [NDICE DE CUADROS CUADRO NO. 1 Clasificación científica de la especie Brosimum utile 4 CUADRO No. 2 Ensayos de identificación es metabolitos dermatofitos. 9 CUADRO NO. 4 Características organolépticas y físico químicas de látex puro de Brosimum utile. Laboratorio de Productos Naturales. Facultad de Ciencias. ESPOCH 38 CUADRO NO. 5

Tamizaje fitoquímico del extracto etéreo de Brosimum utile. Laboratorio de productos naturales. Facultad de Ciencias. ESPOCH. CUADRO No. 6 Tamizaje fitoqu(mico del extracto alcohólico de Brosimum utile. Laboratorio de Productos Naturales. Facultad de Ciencias. ESPOCH. 39 CUADRO No. 7 Tamizaje fitoqu[mico del extracto acuoso de Brosimum utile. Laboratorio de Productos Naturales. Facultad de 40 CUADRO NO. 8 Pruebas de solubilidad co rosimum utile. Laboratorio de productos ultad de antimicrobiana del extracto alcaloideo de Brosimum utile (látex) por el Método de Mitscher.

Concentraciones de 1400 a 2000 pg. Laboratorio de Desarrollo e Investigación. Facultad de Ciencias. ESPOCH. 49 CUADRO NO. 14 Determinación de la actividad antimicrobiana del Método de Mitscher. Klebsiella pneumoniae y Pseudomona aeruginosa Laboratorio de Desarrollo e Investigación. Facultad de Ciencias. ESPOCH. 50 CUADRO NO. 15 Método de Mitscher. Cándida albicans. Laboratorio de Desarrollo e Investigación. Facultad de Ciencias. ESPOCH. 51 CUADRO No. 16 Método de Difusión en agar con disco. Trichophyton rubrum y Epidermophyton floccosum. Laboratorio de ESPOCH CUADRO NO. 17 0 DF 62